巴氏染色液中有苏木素、橘黄、伊红、亮绿及俾士麦棕等染料。其中苏木素是碱性染料，能与细胞核内的主要化学成分脱氧核糖核酸结合而呈紫蓝色。橘黄G、伊红、亮绿为酸性染料，能与细胞质中具有相反电荷的蛋白质结合而呈不同程度的红色、黄色、蓝绿色。巴氏染色结果胞核结构清楚，胞浆透亮鲜丽，胞浆中颗粒分明，是一种较理想的细胞学染色方法。

    1. 因苏木素上有结晶下有沉淀，使用前应用滤纸过滤一遍。染色时要轻拿轻放。苏木素染液在染够1500～2000张玻片的情况下更换新的染液。苏木素的染色时间随气温和染料情况而酌情改变。

    2. 盐酸分化的作用为分化掉胞浆上沾上的苏木素，因此时间不宜长。但如果分化不够，会造成细胞核颜色过深或（及）胞浆很难上色。.分化后立即放入自来水中冲洗。不宜久置，否则可使全部颜色消失。

    3. 碱化亦称返蓝过程，返蓝偏短，苏木色精形成不充分，从而影响染色效果。碳酸锂每缸过500张玻片更新；温水更换德频率当更高。

    4. 橘黄染色时间不宜过长，否则EA50不易上色。橘黄每缸过500张玻片更新。

    5. EA50使用前要充分搅拌，染色过程中提拿、旋转染色架数词。每缸过500～800张玻片后更新。

    6. 技术人员操作要流畅，动作干净利落，不可把上一缸的染色液带入下一缸，每缸交替时要甩干玻片上残存德液体。